Vários grupos de pesquisa têm tentado criar sistemas CRISPR compactos que podem caber em um único vetor AAV, mantendo as capacidades de edição. O grupo da Mammoth Biosciences é um deles; eles podem ter encontrado sucesso. Seus pesquisadores começaram classificando informações de sequência genética de vários tipos de CRISPR encontrados em microrganismos.
Lucas Harrington, diretor científico e cofundador da empresa e ex-aluno da Doudna, afirma que depois de submeter 176 candidatos iniciais a "uma enxurrada de testes", eles descobriram "aquela agulha no palheiro". Essa melhor escolha recebeu o nome de NanoCas; com 425 aminoácidos, é aproximadamente um terço maior que a Cas9. Ela foi projetada por Harrington e seus associados para cortar DNA de mamíferos de forma eficiente.
As principais conclusões do estudo NanoCas incluem:
- A eficiência de edição corresponde à dos sistemas CRISPR de primeira geração: ao mirar o gene PCSK9 no fígado de camundongo in vivo, NanoCas mostrou eficiências de edição de saturação de aproximadamente 60%, em paridade com a de SaCas9, que é cerca de três vezes maior em tamanho. Ambos os sistemas CRISPR reduziram a proteína PCSK9 sérica a níveis indetectáveis.
- Edição robusta de AAV único em vários tecidos musculares: NanoCas demonstrou edição de 10% a 40% do gene da distrofina no quadríceps, panturrilha e músculo cardíaco em um modelo murino humanizado de Distrofia Muscular de Duchenne (DMD), quando administrado por meio de um único vetor AAV.
- Primeira demonstração de edição de músculo AAV único em primatas não humanos: NanoCas alcançou eficiências de edição in vivo de até 30% ao mirar distrofina no músculo esquelético de macacos cynomolgus. NanoCas também mostrou edição de 15% no coração, em comparação com 10% com SaCas9. A análise do tecido hepático mostrou edição mínima fora do alvo.
Objeto: Exigência de participação em um ensaio clínico – Distrofia muscular de Duchenne
Bonjour [Nom du médecin ou Centre],
Permita-me entrar em contato com o sujeito de meu filho, Raaed Bitam, de 10 anos, com diagnóstico de distrofia muscular de Duchenne com uma eliminação do éxon 45. Ele é capaz de marchar atualmente.
Estamos muito interessados em participar de uma clínica de terapia genética (GNT‑0004) e gostaria de saber:
Os critérios de elegibilidade são pré-definidos para esta pesquisa.
Os documentos médicos necessários para a candidatura.
O procedimento para avaliação inicial e inscrição no ensaio.
Vous trouverez ci-joint:
O relacionamento genético confirmou a mutação.
Les comptes-rendus médicaux récents et le suivi neurologique.
Nous serions très reconnaissants de recevoir toute information utile et les prochaines étapes para permitir que nossos filhos participem deste ensaio.
Eu te peço sinceramente para seu tempo e sua atenção.