एक नया "मिनी-सीआरआईएसपीआर" डिस्ट्रोफिन जीन को संपादित करने में अधिक सफल हो सकता है

कई शोध समूह ऐसे कॉम्पैक्ट CRISPR सिस्टम बनाने का प्रयास कर रहे हैं जो संपादन क्षमताओं को बनाए रखते हुए एकल AAV वेक्टर में फ़िट हो सकें। मैमथ बायोसाइंसेज का समूह इनमें से एक है; उन्हें शायद सफलता मिल गई हो। इसके शोधकर्ताओं ने सूक्ष्मजीवों में पाए जाने वाले कई CRISPR प्रकारों से आनुवंशिक अनुक्रम जानकारी को छांटना शुरू किया।

कंपनी के मुख्य वैज्ञानिक अधिकारी और सह-संस्थापक तथा पूर्व डौडना छात्र लुकास हैरिंगटन का दावा है कि शुरुआती 176 आवेदकों को "बहुत सारे परीक्षणों" से गुज़ारने के बाद, उन्होंने "भूसे के ढेर में सुई" की खोज की। उस सर्वश्रेष्ठ विकल्प को नैनोकैस नाम दिया गया; 425 एमिनो एसिड के साथ, यह कैस9 से लगभग एक तिहाई लंबा है। इसे हैरिंगटन और उनके सहयोगियों ने स्तनधारी डीएनए को कुशलतापूर्वक काटने के लिए डिज़ाइन किया था।

नैनोकास अध्ययन से प्राप्त मुख्य निष्कर्ष निम्नलिखित हैं:

• संपादन दक्षता पहली पीढ़ी के CRISPR सिस्टम से मेल खाती है: माउस लिवर में PCSK9 जीन को लक्षित करते समय, नैनोकैस ने लगभग 60% की संतृप्त संपादन दक्षता दिखाई, जो SaCas9 के बराबर है, जो आकार में लगभग तीन गुना बड़ा है। दोनों CRISPR सिस्टम ने सीरम PCSK9 प्रोटीन को अनिर्धारित स्तर तक कम कर दिया।

• एकाधिक मांसपेशी ऊतकों में सशक्त एकल AAV संपादन: नैनोकास ने ड्यूचेन मस्कुलर डिस्ट्रॉफी (DMD) के मानवकृत माउस मॉडल में क्वाड्रिसेप, पिंडली और हृदय की मांसपेशी में डिस्ट्रोफिन जीन के 10% से 40% तक के संपादन को प्रदर्शित किया, जब इसे एकल AAV वेक्टर के माध्यम से वितरित किया गया।

• गैर-मानव प्राइमेट्स में एकल AAV मांसपेशी संपादन का पहला प्रदर्शन: नैनोकैस ने सिनोमोलगस मैकाक की कंकाल की मांसपेशी में डिस्ट्रोफिन को लक्षित करते समय 30% तक की इन विवो संपादन दक्षता हासिल की। नैनोकैस ने हृदय में 15% संपादन भी दिखाया, जबकि SaCas9 के साथ 10% था। यकृत ऊतक के विश्लेषण से न्यूनतम ऑफ-टारगेट संपादन दिखा।

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