20 важных вещей, которые вам нужно знать о генетическом тестировании на МДД

Генетическое тестирование на мышечную дистрофию Дюшенна включает анализ ДНК человека для выявления мутаций в гене дистрофина (DMD). В зависимости от предполагаемой мутации генетическое тестирование может включать MLPA (мультиплексную лигационно-зависимую амплификацию зондов), секвенирование нового поколения (NGS), секвенирование по Сэнгеру, секвенирование всего экзома (WES) или секвенирование всего генома (WGS). Эти тесты помогают выявить крупные делеции, дупликации, точечные мутации и другие генетические варианты, вызывающие заболевания. Поскольку ген дистрофина производит белок, ответственный за поддержание структуры и функции мышц, мутации могут привести к незначительному или полному отсутствию функционального дистрофина, что вызывает прогрессирующую мышечную слабость и дегенерацию, характерные для мышечной дистрофии Дюшенна (МДД).Читать далее: Как узнать, есть ли у моего ребенка мышечная дистрофия?]

Выявляя эти мутации с помощью генетического тестирования, поставщики медицинских услуг могут подтвердить диагноз МДД и предоставить информацию о конкретных генетических изменениях, присутствующих у человека. Эта информация может быть полезна для принятия решений о лечении, прогнозирования прогрессирования заболевания и информирования семьи. [Читать далее: Что такое креатинкиназа (КК)? Что означает высокий уровень креатинкиназы?]

Цель генетического тестирования на МДД

Целью генетического тестирования на МДД является выявление мутаций в гене дистрофина, которые ответственны за возникновение заболевания. Эта информация может помочь поставщикам медицинских услуг подтвердить диагноз МДД и предоставить персонализированные варианты лечения для людей с этим заболеванием. Кроме того, генетическое тестирование также может использоваться для прогнозирования прогрессирования заболевания и помогать семьям принимать обоснованные решения о будущем планировании семьи. В конечном счете, генетическое тестирование на МДД играет решающую роль в улучшении управления и результатов для людей, затронутых этим изнурительным состоянием.

Важность раннего выявления и вмешательства

Раннее выявление и вмешательство являются ключевыми факторами улучшения прогноза и качества жизни людей с МДД. Выявляя заболевание на ранней стадии с помощью генетического тестирования, поставщики медицинских услуг могут инициировать соответствующие вмешательства и методы лечения для замедления прогрессирования мышечной слабости и других симптомов. Это может помочь отсрочить начало осложнений и улучшить общие результаты для пациентов с МДД. Кроме того, раннее выявление обеспечивает ранний доступ к службам и ресурсам поддерживающей терапии, которые могут помочь людям и их семьям справиться с трудностями жизни с прогрессирующим нервно-мышечным расстройством. Поэтому повышение осведомленности о важности раннего выявления и вмешательства при МДД имеет решающее значение для оптимизации ухода за пациентами и результатов.

Процесс генетического тестирования на МДД

Генетическое тестирование является ключевым компонентом в диагностике и лечении МДД. Оно включает анализ ДНК человека для выявления мутаций в гене дистрофина, которые ответственны за возникновение расстройства. Этот процесс обычно начинается с тщательного изучения истории болезни и физического обследования, чтобы определить, соответствуют ли симптомы МДД. Если есть подозрение на МДД, рекомендуется провести генетическое тестирование для подтверждения диагноза и получения ценной информации о конкретной присутствующей генетической мутации. Раннее генетическое тестирование также может помочь выявить носителей мутации в семье, что позволяет проводить генетическое консультирование и принимать решения по планированию семьи.

Сбор и анализ образцов

Сбор и анализ образцов — важный этап в процессе генетического тестирования на МДД. Образцы могут быть собраны с помощью простого забора крови, мазка со щеки или образца слюны. Затем эти образцы отправляются в лабораторию, где они подвергаются секвенированию ДНК для выявления любых мутаций в гене дистрофина. Анализ последовательности ДНК — сложный процесс, требующий специального оборудования и опыта для точного выявления и интерпретации любых генетических изменений. После получения результатов их изучает генетический консультант или поставщик медицинских услуг, который может объяснить последствия полученных результатов и помочь в принятии дальнейших решений по лечению и ведению.

Как проводится генетическое тестирование на МДД

ДНК-тестирование (генетическое секвенирование или анализ мутаций)

• Наиболее распространенный тест включает анализ гена DMD на наличие мутаций. Это можно сделать с помощью образцов крови или слюны. Тест ищет определенные мутации, которые, как известно, вызывают МДД, такие как делеции, дупликации или точечные мутации в гене.
• Анализ делеций/дубликаций: Это часто первый шаг в тестировании. Он проверяет отсутствие или наличие дополнительных копий определенных частей гена, поскольку это наиболее распространенные типы мутаций.
• Секвенирование: Если делеций или дупликаций не обнаружено, можно провести более детальное секвенирование гена для выявления более мелких мутаций.

Узнать больше: Типы генетических вариантов МДД

Тестирование на носительство (для членов семьи)

• Женщины, являющиеся носителями мутации гена DMD (имеют одну копию мутировавшего гена), также могут пройти генетическое тестирование. Это важно для планирования семьи и понимания риска передачи заболевания потомству.

Пренатальное тестирование

• Генетическое тестирование во время беременности может быть проведено для определения того, унаследовал ли плод мутацию МДД, особенно если в семейном анамнезе имеется данное заболевание.

Консультирование и интерпретация результатов

Генетическое тестирование может охватывать различные методы, включая полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и секвенирование, которые могут предоставить ценную информацию о генетическом составе человека. После прохождения тестирования люди могут получить пользу от генетического консультирования, чтобы понять и интерпретировать свои результаты. Генетические консультанты могут дать рекомендации относительно последствий результатов теста и помочь людям ориентироваться в сложной информации, представленной им. Тесно сотрудничая с поставщиками медицинских услуг, генетические консультанты гарантируют, что люди получат персонализированную помощь и поддержку на основе их уникального генетического профиля.

Какой генетический тест лучше всего подходит для диагностики мышечной дистрофии Дюшенна?

Генетическое тестирование является золотым стандартом диагностики мышечной дистрофии Дюшенна (МДД). Благодаря достижениям в области молекулярной генетики, большинству пациентов теперь можно поставить окончательный диагноз без необходимости проведения биопсии мышц.

Существует несколько различных генетических тестов, каждый из которых имеет свои уникальные преимущества, ограничения и клиническое применение. Понимание различий между этими тестами может помочь семьям лучше интерпретировать результаты генетических исследований, оценивать возможность лечения и участвовать в клинических испытаниях.

Приведенное ниже сравнение суммирует наиболее часто используемые генетические тесты для диагностики мышечной дистрофии Дюшенна.

1. MLPA (мультиплексная лигационно-зависимая амплификация зондов)

MLPA — наиболее широко используемый в мире генетический тест первой линии для диагностики мышечной дистрофии Дюшенна.

Что может обнаружить метод MLPA?

Метод MLPA предназначен для идентификации:

• Крупные удаления
• Крупные дубликаты

Примерно:

• У пациентов с ДМД в гене 60–65% обнаружены делеции.
• 8–10% имеют дупликации.

Таким образом, с помощью одного лишь метода MLPA можно идентифицировать приблизительно 70–75% среди всех случаев мышечной дистрофии Дюшенна.

Преимущества

• Быстрое выполнение заказа
• Экономически выгодно
• Предоставляет результаты по каждому экзону.

В типичном отчете может быть указано:

Удаление: Экзоны 45–50

или

Дублирование: Экзоны 2–7

Эта информация чрезвычайно важна для определения:

• Критерии отбора для терапии с пропуском экзонов
• Вопросы генной терапии
• Генетическое консультирование
• Критерии отбора для участия в клинических испытаниях

Ограничения

MLPA не может обнаружить:

• Точечные мутации
• Небольшие вставки
• Небольшие удаления
• Варианты сайтов сплайсинга

2. Целенаправленное секвенирование гена DMD (NGS)

Если метод MLPA не выявляет мутацию, вызывающую заболевание, следующим рекомендуемым тестом обычно является секвенирование нового поколения (NGS) гена DMD.

Метод NGS анализирует приблизительно 2,2 миллиона пар оснований гена DMD и детально исследует его кодирующие области.

Обнаружены мутации

NGS может идентифицировать:

• Миссенс-мутации
• Нонсенс-мутации
• Мутации со сдвигом рамки считывания
• Небольшие удаления
• Небольшие вставки
• Варианты сайтов сплайсинга

Приблизительно у 20–301 пациентов с мышечной дистрофией Дюшенна обнаруживается один из этих типов мутаций.

При совместном использовании MLPA и целевого секвенирования NGS для диагностики мышечной дистрофии Дюшенна (DMD) можно выявить причинную мутацию примерно у 95–991 пациентов (TP171T).

3. Секвенирование по Сэнгеру

До широкого распространения секвенирования нового поколения (NGS) секвенирование по Сэнгеру считалось золотым стандартом для секвенирования ДНК.

Сегодня он в основном используется для:

• Подтвердите варианты, обнаруженные с помощью NGS.
• Тестовые члены семьи
• Проверить наличие предполагаемых патогенных вариантов.
• Проведите целенаправленный анализ конкретных участков ДНК.

Преимущества

• Чрезвычайно точный
• Отлично подходит для подтверждения отдельных вариантов.

Ограничения

• Это очень трудоемкий процесс для крупных генов, таких как DMD.
• Это дорого, если необходимо секвенировать все 79 экзонов.
• Не позволяет надежно обнаруживать крупные делеции или дупликации.

По этим причинам секвенирование по Сэнгеру в настоящее время является в основном подтверждающим тестом, а не основным диагностическим инструментом.

4. Секвенирование всего экзома (WES)

Полногеномное секвенирование исследует все кодирующие белки гены в геноме человека, а не только ген DMD.

Он анализирует приблизительно 20 000 генов одновременно.

Преимущества

WES особенно полезен в следующих случаях:

• Результаты теста на мышечную дистрофию Дюшенна отрицательные.
• Подозревается еще одно наследственное заболевание мышц.
• Врачи должны различать различные нервно-мышечные расстройства.

Она позволяет выявлять такие расстройства, как:

• Мышечная дистрофия Беккера
• Пояснично-конечностная мышечная дистрофия
• Врожденные миопатии
• Другие редкие нервно-мышечные заболевания

Ограничения

Как правило, секвенирование всего экзома не является методом выбора при наличии серьезных подозрений на мышечную дистрофию Дюшенна, поскольку целенаправленное тестирование на ДМД является более экономически эффективным и проще в интерпретации.

5. Секвенирование всего генома (WGS)

В настоящее время полногеномное секвенирование является наиболее полным доступным генетическим тестом.

Вместо анализа только кодирующих областей, полногеномное секвенирование исследует весь геном человека.

Примерно:

3,2 миллиарда пар оснований ДНК

анализируются.

WGS может обнаружить

• Варианты кодирования
• Интронные варианты
• Мутации в регуляторной области
• Структурные варианты
• Крупные хромосомные перестройки
• Изменение номера копии

Преимущества

• Высочайший диагностический потенциал
• Обнаруживает самый широкий спектр типов мутаций.
• Всё чаще используется в научных исследованиях и сложных диагностических случаях.

Ограничения

• Дорогой
• Генерирует огромные объемы данных
• Требуется углубленный биоинформатический анализ.
• В настоящее время этот метод пока не является стандартным во многих системах здравоохранения.

Какой генетический тест наиболее точен?

Ответ зависит от того, что подразумевается под словом “наиболее точный”.”

Для рутинной клинической диагностики

Сочетание:

• MLPA
• Целенаправленное секвенирование нового поколения для диагностики мышечной дистрофии Дюшенна

Считается, что в настоящее время это является золотым стандартом клинической диагностики мышечной дистрофии Дюшенна.

В совокупности эти тесты позволяют выявить мутацию, вызывающую заболевание, примерно у 95–991 пациентов (TP171T).

Для наиболее полного генетического анализа

Полногеномное секвенирование (WGS) обеспечивает наиболее полную оценку, поскольку оно исследует весь геном, а не только ген DMD.

Однако его высокая стоимость и сложность в настоящее время ограничивают его рутинное клиническое применение.

Сравнение разрешения тестов

Рекомендуемый алгоритм диагностики мышечной дистрофии Дюшенна

В настоящее время международные рекомендации по лечению нервно-мышечных заболеваний, как правило, предусматривают следующий диагностический алгоритм:

1. Анализ на креатинкиназу (КК) в сыворотке крови – Подтверждает клиническое подозрение, но не может подтвердить мышечную дистрофию Дюшенна.
2. MLPA – Первичный генетический тест для выявления крупных делеций и дупликаций.
3. Целенаправленное секвенирование DMD NGS – Проводится в случае отрицательного результата MLPA для выявления точечных мутаций и небольших вариантов.
4. Полногеномное секвенирование (WES) или полногеномное секвенирование (WGS) – Рассматривается в случаях, когда целенаправленное тестирование не позволяет выявить причинную мутацию или подозревается другое нервно-мышечное заболевание.
5. Биопсия мышц – Используется в редких случаях, когда результаты генетического тестирования неубедительны или когда необходимо оценить экспрессию белка дистрофина.

Какую информацию следует включить в генетический отчет по мышечной дистрофии Дюшенна?

Получение диагноза мышечной дистрофии Дюшенна — это только первый шаг. Качественный генетический отчет должен содержать достаточно подробную информацию для принятия решений о лечении, определении права на участие в клинических исследованиях и консультировании семьи.

В идеале отчет должен включать:

• Точная номенклатура вариантов HGVS (например, c.6439C>T (p.Arg2147Ter))
• Тип мутации (делеция, дупликация, нонсенс-мутация, миссенс-мутация, мутация в сайте сплайсинга, вставка, удаление и т. д.)
• Пораженный(е) экзон(ы) (например, Удаление экзонов 45–50)
• Независимо от того, является ли мутация вне рамки считывания или в рамках рамки считывания.
• Клиническая классификация (патогенный, вероятно патогенный, вариант неопределенного значения и т. д.)

Эта информация необходима для определения соответствия критериям для проведения терапии с пропуском экзонов, генной терапии, клинических испытаний, специфичных для конкретных мутаций, генетического консультирования и будущих подходов к персонализированной медицине. УЗНАЙТЕ БОЛЬШЕ: Инструмент проверки экзонов DMDWarrior

Преимущества генетического тестирования на МДД

Диагноз: Генетический тест подтверждает, есть ли у человека МДД и какая именно мутация задействована. Это имеет решающее значение для правильного лечения и ухода.

Решения о лечении: Ранняя диагностика может привести к более эффективному лечению заболевания и позволить принять меры, помогающие замедлить его прогрессирование.

Планирование семьи: Тестирование на носительство может помочь членам семьи понять свои генетические риски и сделать осознанный выбор в отношении репродукции.

Ранняя диагностика и планирование лечения

Выявляя конкретные генетические мутации, вызывающие заболевание, поставщики медицинских услуг могут адаптировать стратегии лечения для устранения основной причины заболевания. Этот персонализированный подход может помочь замедлить прогрессирование МДД и улучшить качество жизни пациентов. Кроме того, раннее вмешательство может помочь устранить потенциальные осложнения и сопутствующие заболевания, связанные с МДД, такие как респираторные и сердечные проблемы. Поэтому генетическое тестирование играет решающую роль в комплексном уходе за людьми с МДД.

Тестирование на носительство для членов семьи

Выявление носителей заболевания в семье позволяет медицинским работникам предлагать генетическое консультирование и поддержку, помогая людям понять риск передачи заболевания будущим поколениям. Эта информация позволяет членам семьи принимать обоснованные решения о планировании семьи и репродуктивных возможностях. Кроме того, тестирование на носительство может помочь выявить лиц, подверженных риску развития симптомов мышечной дистрофии Дюшенна в более позднем возрасте, что позволяет проводить раннее вмешательство и активно управлять заболеванием. В целом, генетическое тестирование и тестирование на носительство являются важными инструментами в лечении мышечной дистрофии Дюшенна и могут значительно повлиять на здоровье и благополучие людей и их семей. Узнайте больше: Карриеры Дюшенна

Пренатальное тестирование для беременностей с высоким риском

Пренатальное обследование может предоставить ценную информацию о здоровье плода и помочь родителям принять решения относительно беременности и дальнейшего ухода за ребенком. Выявление мышечной дистрофии Дюшенна внутриутробно позволяет родителям совместно с медицинскими работниками разработать комплексный план лечения и обеспечить ребенку необходимую поддержку и лечение с момента рождения. Пренатальное тестирование Также это может помочь семьям эмоционально и психологически подготовиться к трудностям, связанным с воспитанием ребенка с мышечной дистрофией Дюшенна. В целом, пренатальное тестирование играет решающую роль в ранней диагностике и лечении мышечной дистрофии Дюшенна, в конечном итоге улучшая результаты как для ребенка, так и для его семьи. Узнайте больше: Что такое пренатальное тестирование при мышечной дистрофии Дюшенна?

Узнать больше: Генетические причины мышечной дистрофии Дюшенна

Часто задаваемые вопросы о генетическом тестировании на мышечную дистрофию Дюшенна

Краткое изложение основных моментов генетического тестирования на МДД

Мышечная дистрофия Дюшенна — это генетическое заболевание, которое в основном поражает мальчиков, вызывая прогрессирующую мышечную слабость и потерю функции. Генетическое тестирование имеет решающее значение для ранней диагностики этого состояния, поскольку оно может помочь определить варианты лечения и предоставить ценную информацию для семей и поставщиков медицинских услуг. Определив конкретную генетическую мутацию, ответственную за Дюшенн, люди могут получить персонализированную помощь и поддержку для управления симптомами и улучшения качества жизни.

Узнайте больше: Изучите клинические исследования мышечной дистрофии Дюшенна.

- Подписывайтесь на нас -